Горностаев С.Н.
Ведущий специалист по
Гематологии и Цитохимии
НПФ «АБРИС+»

Морфологическая диагностика заболеваний отличается наибольшей достоверностью и многие старые и новые методы лабораторной диагностики, имеющие очень большое значение, особенно в совокупности, не могут исключить морфологические методы исследования из клинической практики. Вместе с тем морфологические исследования в клинике приобретают особую значимость, если анализируются в сопоставлении со всеми данными клиники во всем их объеме.

Чтобы максимально обеспечить интересы клиники, интересы конкретного больного человека, морфологический диагноз должен быть предельно точным и объективно отражающим особенности конкретного заболевания.

В настоящее время успехи в обеспечении здоровья населения во многом зависят от проведения массовых профилактических осмотров и в первую очередь групп с повышенным риском различными заболеваниями, особенно злокачественными новообразованиями.

Важным аспектом клинического обследования является внимательное и полное изучение клеточной морфологии. Почти каждое заболевание, поражающее клетки крови, может быть визуализировано либо в форме цитологических изменений морфологии клеток, либо сдвигами распределения разных типов клеток. Разные области медицины объединяют методы исследований и постановки диагноза, а именно – морфологический анализ окрашенных препаратов с помощью микроскопов.

Хорошо известно, что правильная и качественная окраска мазков крови и костного мозга имеет большое значение для точной оценки изменений морфологии клеток. В связи с этим качественные препараты периферической крови и костного мозга играют важную роль в диагностике и контроле лечения гематологических заболеваний.

Морфологический анализ включает в себя три основных пункта:

• преаналитический этап (подготовка пациента к исследованию, забор биоматериала, подготовка препарата)
• аналитический этап (фиксация и окрашивание)
• постаналитический этап (микроскопическое исследование клеточных элементов)

Приготовление препаратов возможно двумя способами: ручным и с помощью автоматов и центрифуг. Существующие автоматические устройства для приготовления и окраски мазков позволяют стандартизовать условия и повысить качество препаратов, однако автоматический способ пока не нашел широкого распространения в наших лабораториях, поэтому напомним некоторые постулаты «ручного» метода. Не касаясь вопросов, как подготовка пациента к забору биоматериала, непосредственно забор биоматериала и доставка к месту исследования, которые сами по себе очень важны, коснусь вопросов дальнейшего использования полученных материалов.

Особенности преаналитического этапа при гематологических и цитохимических исследованиях состоят из:

1. Правильной и качественной подготовки стекол для исследования.
2. Правильно приготовленного препарата.
3. Правильно подобранном и использованном антикоагулянте
4. Условий хранения нефиксированных препаратов
5. Подбор фиксаторов и красителей для фиксации и окраски препаратов, режимов для фиксации и окраски
6. Использование «забуференной» воды для приготовления рабочих растворов.

В рамках данной статьи хотелось бы остановиться и разобраться с таким каменм преткновения, как качественная и правильная подготовка стекол для исследования.

Правильная оценка морфологических особенностей возможна лишь на хорошо приготовленных и надлежащим образом окрашенных мазках. То есть стекла не только должны быть хорошо отмыты, но и обезжирены. Это касается как новых, а тем более уже использованных, что чаще встречается. Предметные и покровные стекла должны быть безупречно вымыты и обезжирены. В настоящее время российскими производителями предметные стекла, не нуждающиеся в обезжиривании, не выпускаются. Импортные стекла, не нуждающиеся в очистке и обезжиривании имеют маркировку «pre cleaned».

Новые стекла могут использоваться без предварительной обработки, необходимо лишь обезжиривание в смеси состоящей из равных частей спирта и эфира. Ранее использованные стекла замачиваются в растворе стирального порошка или мыла с перекисью водорода, после чего, спустя сутки, промываются проточной водой, заливаются раствором стирального порошка или мыла и доводят до кипения, по окнчании процедуры промывают проточной водой с щеткой,высушиваются и опять же помещаются в смесь спирта и эфира. Ранее для подобных целей использовалась смесь Никифорова, представляющая смесь этанола+диэтилового эфира в пропорции 1:1, однако из-за возможного воспламенения реагентов, входящих в ее состав, от нее пришлось отказаться. В настоящее время компания «АБРИС+» предлагает смесь для обезжиривания, не уступающую по своим свойствам прежней смеси Никифорова. В такой смеси происходит окончательное обезжиривание стекол, после чего стекла необходимо извлечь, просушить или протереть чистой, безворсистой тканью и хранить в чистом месте. В дальнейшем стекла извлекаются по мере надобности и, по возможности, не касаясь поверхности стекол.

При сильных загрязнениях предметных стекол можно воспользоваться следующей методикой – обработка серной кислотой, затем кипячение 10-15 мин в 2-5%-ном растворе соды, после тщательно промывают водой и помещают в смесь для обезжиривания.

Для проверки качества очистки и обезжиривания можно капнуть дистиллированной водой на предметное стекло, на хорошо очищенном и обезжиренном стекле капля растекается, если недостаточно обезжирено-вода собирается в капли. Возможно также воспользоваться так называемой фенолфталеиновой пробой, предназначенной для определения остаточных количеств щелочных компонентов моющих препаратов на изделиях медицинского назначения.

На контролируемое изделие (предметное стекло) наносят 2-3 капли спиртового раствора фенолфталеина или протирают его тампоном, смоченном в реактиве. При наличии на изделиях медицинского назначения остатков моющих средств раствор фенолфталеина окрашивается в розовый цвет.

Конечно, чистые и обезжиренные стекла – этот этап подготовки к исследованию очень много значит для правильного и качественного анализа, но особенности преаналитического этапа на этом не заканчиваются и лишь соблюдение всех особенностей позволит говорить о том, что ошибки, свойственные преаналитическому этапу устранены. Подготовка к исследованию, равно как и само исследование сродни искусству и все здесь, как в искусстве, ведь для художника очень важны не только озарение и внутренний свет, но без хороших кистей, обстановки, мольберта вряд ли может получиться картина, достойная, чтобы любоваться ею…