Узнавайте о продуктах и событиях нашей компании самыми первыми.
Это просто и бесплатно.

Набор реактивов для проведения тимоловой пробы в сыворотке крови

ТОЛЬКО ДЛЯ IN VITRO ДИАГНОСТИКИ!     

Кат.№ 332.1.330 - 330 опр. (при расходе рабочего раствора тимола 3 мл на одно определение)            

 

Принцип метода [1]:

Определение основано на появлении мутности при образовании глобулин-тимол-липопротеиновых комплексов в результате взаимодействия тимолового реактива с сывороткой крови при рН 7,55, имеющей максимум поглощения  при   l = 630 нм (600-690 нм).

 

Исследуемый материал :

Сыворотка крови. Гемолиз недопустим.

 

Состав набора и условия хранения:

1. Концентрированный раствор тимола в трис-малеатном буфере - 6,66 ммоль/л;

2. Серная кислота - 2 моль/л;

3. Хлорид бария - 48 ммоль/л.

 

Компоненты набора стабильны в течение 24 месяцев при температуре 18-25°С.

Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.

 

 

Аналитические характеристики набора:

Линейность -  до 20 ед. S-H

Коэффициент вариации - не более 8 %.

 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

В состав набора входят едкое вещество - серная кислота и вредное вещество - хлорид бария. При работе с ними следует соблюдать правила техники безопасности.

 

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ТИМОЛА (Рабочий раствор №1):

        1-й вариант: в мерную колбу объёмом 500 мл внести 200 мл дистиллированной или деионизованной воды. При постоянном перемешивании внести 7,5 мл концентрированного раствора тимола. Довести дистиллированной или деионизованной водой до метки. Перемещать  в течение 10 мин.

        2-й вариант: в мерную колбу объёмом 1000 мл внести 400 мл дистиллированной или деионизованной воды. При постоянном перемешивании внести 15 мл концентрированного раствора тимола. Довести дистиллированной или деионизованной водой до метки. Перемещать  в течение 10 мин.

        Рабочий раствор тимола хранить  в плотно закрытой посуде при комнатной температуре в течение 3 месяцев. При появлении осадка фильтровать через бумажный фильтр.

 

ПОСТРОЕНИЕ КАЛИБРОВОЧНОГО ГРАФИКА:

1.      Приготовление рабочего раствора серной кислоты (Рабочий раствор №2).

В мерную колбу объёмом 100 мл количественно перенести 5 мл серной кислоты (2 моль/л). Довести до метки дистиллированной или деионизованной водой.

2.       Приготовление суспензии сульфата бария (Рабочий раствор №3).

Готовится непосредственно перед построением калибровочного графика.

В мерную колбу объёмом 50 мл внести 1,5 мл хлорида бария (48 ммоль/л). Довести до метки рабочим раствором №2, охлажденным до +10°С. Тщательно перемешать.

3.       Приготовление калибровочных растворов и построение  калибровочного графика.

Из рабочих растворов №№ 2 и 3 готовят эталоны мутности, соответствующие единицам S-H.

 

№ п/п	Рабочий раствор№2, мл	Рабочий раствор№3, мл	Единицы S-H
1	4,5	1,5	5
2	3,0	3,0	10
3	1,5	4,5	15
4	0	6,0	20
Смешать и инкубировать 30 минут при температуре 18-25°С. Перед  фотометрированием пробы энергично перемешать. Измерить оптическую плотность калибровочных проб против дистиллированной (деионизованной) воды при λ = 630 (600-690) нм и d = 1 см.

 

 

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА:

Внести в пробирку	Опытная проба	Контроль на реактивы	Холостая проба (готовится в случае исследования липемичных сывороток)
Рабочий раствор№1, мл	3,0	3,0	-
Сыворотка крови	0,05	-	3,0
Физиологический раствор	-	0,05	0,05
Смешать и инкубировать 30 минут при температуре 18-25°С. Перед  фотометрированием пробы энергично перемешать. Измерить оптическую плотность калибровочных проб против дистиллированной (деионизованной) воды при λ = 630 (600-690) нм и d = 1 см.

      Расчет: Определить помутнение по калибровочному графику.

Если помутнение превышает 20 ЕД. S-H в сыворотке крови, развести исследуемый образец  физиологическим раствором в соотношении 1:1, повторить анализ, а результат умножить на 2.

 

ВНИМАНИЕ: Для приготовления тимолового реактива и для проведения пробы использовать чистую посуду без следов синтетических моющих средств, т.к. они препятствуют развитию преципитата.

 

Референтные пределы [1]:

            0-4 ЕД. S-H

Литература: 

1. В.Г.Колб, В.С.Камышников, Клиническая биохимия, изд. «Беларусь», Минск, 1976 г., стр.30.

 

дизайн и разработка
Segmenta media. 2009