Холестерин ЛПНП ("Серия САПФИР")
Инструкция по применению набора реагентов для определения концентрации ЛПНП-холестерина в сыворотке и плазме крови прямым энзиматическим колориметрическим методом без осаждения.
ТОЛЬКО ДЛЯ IN VITRO ДИАГНОСТИКИ !
Кат.№ С053.1.100 - 100 определений при конечном объеме пробы 1,2 мл.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
В результате взаимодействия исследуемого образца с полианионными и амфотерными детергентами, входящими в состав Реагента 1, происходит связывание ЛПНП, что делает их недоступными для взаимодействия с холестеролэстеразой. Остальные фракции липо-протеинов (хиломикроны, ЛПОНП и ЛПВП) подвергаются ферментативной деградации с участием холестеролэстеразы, холестеролоксидазы и каталазы с образованием бесцветных продуктов реакции. При добавлении в реакционную смесь Реагента 2 происходит ингибирование каталазы и разрушение комплекса Детергенты-ЛПНП, что делает холестерин-ЛПНП доступным для взаимодействия с холестеролэстеразой. Далее опреление проводится по следующей схеме:
ЛПНП-холестерин + Н2О - холестеролэстераза → холестерин + жирные кислоты
Холестерин + О2 - холестеролоксидаза → холест-4-ен-3-ен-он + Н2О2
2Н2О2 + 4-AAП + ГСДА + фенол - пероксидаза → квининомин + 4Н2О
Где: 4-ААП – 4-аминоантипирин, ГСДА- гидроксисульфопропилдиметилоксианилин.
Концентрация квининомина, определяемая фотометрически при λ = 578 (600) нм, пропорцио-нальна концентрации ЛПНП холестерина в исследуемом образце.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ:
Сыворотк или гепаринизированная плазма крови. Гемолиз недопустим. Образцы стабильны при температуре -20°С в течение 5 суток. Избегать повторного замораживания и оттаивания образца.
СОСТАВ НАБОРА И УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ:
Реагент 1, рН 6,8, 90 мл
Good’s буфер;
Холестеролэстераза;
Холестеролоксидаза;
Каталаза;
ГСДА ;
Детергенты и стабилизаторы.
Реагент 2, рН 7,0, 30 мл
Ингибитор каталазы;
4-ААП;
Пероксидаза.
Детергенты и стабилизаторы
Калибратор ( лиофилизат) – 1,0 мл.
Реагенты 1 и 2 готовы к использованию и стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8°С в темноте. Лиофилизат калибратора перед использованием необходимо растворить в 1,0 мл дистиллрованной или деионизованной воды. Раствор калибратора готов к использованию через 30 минут после начала растворения и стабилен в течение 7 суток при температуре 2-8°С. Концентрация ЛПНП-холестерина в полученном растворе калибратора указана на этикетке. Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:
Линейность - 0,02-10,34 ммоль/л;
Коэффициент вариации - 5 %.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА:
|
Внести в кювету |
Микроанализ |
Полумикроанализ |
Макроанализ |
|
Реагент 1, мкл |
270 |
450 |
900 |
|
Исследуемый образец или калибатор мкл |
3 |
5 |
10 |
|
Смешать и инкубировать 5 минут при температуре 37°С . По окончании инкубации измерить оптическую плотность (Е1) при λ = 578 (600 нм), d= 1 см против воздуха. |
|||
|
Реагент 2 , мкл |
90 |
150 |
300 |
|
Смешать и инкубировать точно 5 минут при температуре 37°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность (Е2) при λ = 578 (600 нм), d= 1 см против воздуха. Расчитать ΔЕ = Е2 –Е1. |
|||
РАСЧЕТ:

где: С – концентрация ЛПНП-холестерина в калибраторе.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ:
Норма: <3,9 ммоль/л
Группа риска: 3,9-4,9 ммоль/л
Патология: > 4,9 ммоль/л
ПАРАМЕТРЫ ПРОГРАММИРОВАНИЯ
|
Наименование набора реагентов |
ХОЛЕСТЕРИН |
|
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) |
любой |
|
Метод измерения |
2-точеченая кинетика |
|
Длина волны, нм |
578 (600) |
|
Измерение против |
воздуха |
|
Температура реакции, °С |
37 |
|
Фактор |
- |
|
Концентрация стандарта |
указана на флаконе |
|
Соотношение реагент1/ проба/Реагент2 (мкл/мкл/мкл) |
270:3:90 |
|
Количество измерений, не менее |
1 |
|
Время инкубации № 1, сек |
300 |
|
Время инкубации № 2, сек |
300 |
|
Единицы измерения |
ммоль/л |
|
Границы линейности |
0,02-4,65 |
196135, Россия, Санкт-Петербург, а/я 355;
196143, Россия, С.Петербург, пр. Гагарина, 65;
тел./факс:(812) 727-24-40, 727-88-18;
e-mail: abris@abrisplus.ru;
http://www. abrisplus.ru.
Новости
Внимание конкурс!
Стартовал фотоконкурс под девизом "40 лет HUMAN Diagnostics Worldwide - 40 лет партнерства!"
подробнее >>>
Новинка производства- Формалиновый буфер
Формалиновый буфер (10% забуференный формалин) применяют как фиксирующую среду для транспортировки гистологического материала в патологоанатомическое отделение или в гистологическую лабораторию. Формалиновый буфер может быть использован в качестве фиксирующей жидкости при хранении архива.
подробнее >>>
Акция на ЭМ-контейнер (контейнер дезинфектор)
С 23 января по 1 марта цены на ЭМ-контейнер снижены!
подробнее >>>

