Узнавайте о продуктах и событиях нашей компании самыми первыми.
Это просто и бесплатно.

Диахим-Набор для клинического анализ кала (копрограмма)

Инструкция по применению

Набор реагентов для клинического анализа кала предназначен для обнаружения в кале скрытой крови, билирубина и стеркобилина и микроскопического исследования кала в клинико-диагностических лабораториях. Набор расчитан на анализ 1000 проб для обнаружения скрытой крови, 50 проб для качественного определения стеркобилина, 200 проб для качественного определения билирубина и 2000 проб для проведение микроскопического анализа кала.

Принцип реакции:

Морфологическое и химическое исследования кала дают суммарное представление о функции важнейших пищевари тельных желез, оно отражает степень переваривания принятой пищи и состояние слизистой кишечного тракта. Определение скрытой крови. В присутствии гемоглобина крови бензидин реагирует с перекисью водорода с образованием в течение первых 2 минут соединений, окрашенных в зеленый, сине-зеленый или синий цвет. Интенсивность окраски пропорциональна количеству крови в кале. Определение стеркобилина. Стеркобилин взаимодействует с уксуснокислым цинком в присутствии раствора Люголя с образованием соединений, дающих зеленую флюоресценцию. Определение билирубина. Билирубин, поступающий в кишечник с желчью, под влиянием кишечной флоры восстанавливается, в результате чего образуется уробилин (стеркобилин) - нормальный пигмент кала и уробилиноген - продукт более полного восстановления. Билирубин под действием реактива Фуше превращается в зеленый биливердин; интенсивность окраски пропорциональна количеству билирубина в кале.

Реагенты:

• Бензидин - 1 флакон (1,0 г)
• Уксусная кислота (50%) - 1 флакон (100 мл)
• Гидроперит - 1 упаковка
• Уксусная кислота (30 %) - 1 флакон (100 мл)
• Уксуснокислый цинк (10%) - 1 фл (100 мл)
• Раствор Люголя - 1 флакон (50 мл)
• Реактив Фуше - 1 флакон (100 мл)
• Раствор судана III (2%) - 1 флакон (100 мл)
• Глицерин - 1 флакон (130 г)
• Метиленовый синий (2%) - 1 флакон (20 мл)

Оборудование:

• фарфоровые ступки;
• стеклянные палочки;
• чашки Петри;
• воронки;
• предметные стекла;
• покровные стекла;
• пробирки;
• штативы;
• горелка;
• весы;
• микроскоп;
• бумага фильтровальная;
• перчатки резиновые.

Приготовление нативных препаратов:

Кусочек кала величиной с лесной орех помещают в ступку, добавляют немного водопроводной воды и растирают до консистенции жидкой кашицы. Капли приготовленной эмульсии стеклянной палочкой наносят на предметные стекла и готовят не менее 6 препаратов: нативный, с раствором Люголя, с метиленовым синим, с суданом III, с 30% уксусной кислотой и глицерином.

Проведение определения:

1. Определение скрытой крови

Приготовление 3% раствора перекиси водорода

Растворить 3 таблетки гидроперита в 50 мл дистиллированной воды. Раствор стабилен при хранении в посуде из темного стекла и температуре 2-8 С в течении 3 месяцев.

Приготовление раствора бензидина

Перед употреблением немного бензидина (~500 мг) растворяют в 5 мл 50% уксусной кислоты до полного растворения. Раствор годен к употреблению, нестойкий.

Ход определения

Неразведенный кал наносят толстым слоем на предметное стекло, добавляют 2-3 капли раствора бензидина в уксусной кислоте и столько же перекиси водорода. Перемешивают стеклянной палочкой. Положительная реакция на кровь дает зеленое или сине-зеленое окрашивание в течение первых 2 мин. Окрашивание, наступившее позже, чем через 2 мин, не учитывают.

2. Определение билирубина

Приготовление эмульсии кала: кусочек кала помещают в фарфоровую ступку и растирают в небольшом количестве дистиллированной воды или изотоническим растворе хлорида натрия. Эмульсию кала поместить в 2 пробирки по 1-2 мл, в опытную пробирку добавить по каплям реактив Фуше (объем реактива не должен быть больше эмульсии кала). В присутствии билирубина появляется зеленое или зеленоватое окрашивание. Сравнить опытную и контрольную окраску в проходящем свете.

3. Определение стеркобилина

Приготовление эмульсии кала: кусочек кала помещают в фарфоровую ступку и растирают в небольшом количестве дистиллированной воды или изотоническим растворе хлорида натрия.

Приготовление рабочего раствора Люголя

Разбавить раствор Люголя дистиллированной водой в соотношении 1:1. Эмульсию кала внести в пробирку в количестве 1-2 мл, добавить 1-2 мл раствора уксуснокислого цинка (предварительно взболтать) и 1 каплю рабочего раствора Люголя. Полученную смесь профильтровать в стеклянную пробирку, при наличии стеркобилина (положительнаяреакция) раствор дает зеленую флюоросценцию, видную на темном фоне.

4. Исследование нативного препарата

При микроскопическом исследование нативного препарата различают следующие элементы: детрит, остатки пищи, элементы слизистой оболочки кишечника, кристаллические образования, флору, мышечные волокна, нейтральный жир в виде бесцветных капель, жирные кислоты и мыла. растительную клетчатку и крахмал, микроорганизмы, яйца гельминтов, кристаллы.

5. Исследование кала с суданом III

Капли нейтрального жира и капли жирных кислот окрашиваются в оранжевый цвет. Нагревание такого препарата ведет к расщеплению мыл (если они есть) и образованию капель жирных кислот, которые также окрашиваеются в оранжевый цвет. На предметное стекло стеклянной палочкой нанести 1-2 капли эмульсии кала или жидкой каловой массы, внести в препарат 1-2 капли раствора судана III, эмульсия и реактив смешивают краем покровного стекла и рассматривают сначала под малым (8х10), а затем под большим (40х10) увеличением.

6. Исследование кала с метиленовым синим

Для получения 0,5% раствора метиленового синего, перед использованием, 2% раствор метиленового синего разбавить дистиллированной водой в соотношении 1:3. При обнаружении жира в виде капель микроскопируют препарат с метиленовым синим, капли нейтрального жира бесцветны, капли жирных кислот окрашены в голубой или синий цвет. На предметное стекло стеклянной палочкой нанести 1-2 капли эмульсии кала или жидкой каловой массы, внести в препарат 1-2 капли раствора метиленового синего (0,5%), эмульсия и реактив смешивают краем покровного стекла и рассматривают сначала под малым (8х10), а затем под большим (40х10) увеличением.

7. Исследование кала с глицерином

Глицерин очищает от бактерий и калового дейтрита яйца гельминтов, ≪просветляет≫ препарат и помогает установить принадлежность обнаруженных яиц. При обнаружении яиц гельминтов необходимо провести специальное исследование по Като. На предметное стекло стеклянной палочкой нанести 1-2 капли эмульсии кала или жидкой каловой массы, внести в препарат 1-2 капли глицерина, эмульсия и глицерин смешивают краем покровного стекла и рассматривают сначала под малым (8х10), а затем под большим (40х10) увеличением.

8. Исследование кала с нагреванием

Дифференцирует жирные кислоты от мыл. При обнаружении глыбок и игл нативный препарат подогревают (не доводя до кипения) и тотчас микроскопируют. Образование капель после нагревания указывает на наличие жирных кислот, при остывании препарата капли вновь превращаются в глыбки (препарат можно подогреть повторно. Если при нагревании капель не образовалось, а иглы и глыбки остаются , нагревают препарат с уксусной кислотой.

9. Исследование с 30% раствором уксусной кислоты

Глыбки и кристаллы мыл сплавляются в капли после нагрева (до кипения) препарата с уксусной кислотой . Уксусная кислота расщепляет мыла и освобождает жирные кислоты, которые плавятся, образуя капли.

Меры предосторожности

Меры предосторожности - соблюдение правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах ) санитарно- эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР≫, Москва, 1981г. При работе следует одевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать возбудители вирусной инфекции.

Условия хранения и эксплуатации

Хранение реагентов при tº 2-25º С в темном месте. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.

дизайн и разработка
Segmenta media 2009