ДИАХИМ-ГЕМИСТЕЙН-М-Г Фиксатор по Май-Грюнвальду

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:

Приготовление нейтрализованной воды:

Для приготовления рабочего раствора красителя необходимо использование забуференной (рН 6,8 – 7, 2) воды. Для этих целей можно использовать реагенты производства НПФ «АБРИС+» «Диахим-ГемиСтейн-Буфер-Г» кат.№ 463 или кат.№ 464 , или приготовить самостоятельно.

Приготовление забуференной воды:

Вариант 1: Использовать «Диахим-ГемиСтейн-Буфер-Г», кат.№ 463. Приготовить согласно инструкции по применению.

Вариант 2: Использовать «Диахим-ГемиСтейн-Буфер-Г», кат.№ 464. Приготовить согласно инструкции по применению. 

Вариант 3: Взвесить на аналитических весах с точностью ± 0,01 г 9,50 г натрия фосфорнокислого двузамещенного безводного или 22,70 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного; навеску перенести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл, добавить 900 мл дистиллированной воды, перемешать до растворения, довести до 1000 мл дистиллированной водой и тщательно перемешать (раствор 1).

Взвесить на аналитических весах с точностью ± 0,01 г 9,07 г калия фосфорнокислого однозамещенного; навеску внести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл, добавить 900 мл дистиллированной воды, перемешать до растворения, довести до 1000 мл дистиллированной водой и тщательно перемешать (раствор 2).

Внести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл 63 мл раствора 1 и 37 мл раствора 2, довести до 1000 мл дистиллированной водой и определить рН полученной забуференной воды на рН-метре; рН должен находиться в диапазоне 6,8 - 7,2.

Полученную забуференную воду можно хранить при комнатной температуре (+18 - 25°С).

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА (методика окраски):

1-й способ.

Непосредственно перед определением приготовить рабочий раствор красителя азур-эозин по Романовскому: смешать раствор красителя с забуференной водой в соотношении 1:10 - 1:20 и профильтровать. Полученный рабочий раствор красителя можно хранить в течение 6 часов.

На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фиксатора-красителя так, чтобы он покрыл весь мазок. Через 3 мин. слить фиксатор-краситель и далее красить рабочим раствором красителя азур-эозин по Романовскому в течение 15 - 45 мин. По истечении этого времени препараты промыть забуференной водой, высушить на воздухе и микроскопировать.

2-й способ.

Непосредственно перед определением разбавить фиксатор-краситель забуференной водой в соотношении 1:2 - 1:5. Полученный разбавленный раствор фиксатора-красителя можно хранить в течение 6 часов.

На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фиксатора-красителя так, чтобы он покрыл весь мазок. Через 3 мин. смыть фиксатор-краситель забуференной водой и далее красить разбавленным раствором фиксатора-красителя в течение 5 - 15 мин. По истечении этого времени препараты промыть забуференной водой, высушить на воздухе и микроскопировать.

РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ:

Окраска форменных элементов крови должна быть следующей:

эритроциты - розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые;

тромбоциты - розово-фиолетовые или фиолетовые;

ядра лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов - фиолетовые;

цитоплазма лимфоцитов - голубая, серо-голубая или сине-голубая;

цитоплазма моноцитов - серо-голубая;

цитоплазма нейтрофилов - бледно-розовая или розово-серая;

зернистость нейтрофилов - фиолетовая или красно-фиолетовая;

зернистость эозинофилов - оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая;

зернистость базофилов - фиолетовая.