8 800 333 73 24БЕСПЛАТНО ПО РОССИИ

ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-НЭ Определение неспецифической эстеразы в лейкоцитах

Консультант раздела:

Специалист по гематологии, цитологии и цитохимии (продукция производства НПФ «АБРИС+») Михалевич Юлиана Николаевна

Тел.: (812) 740-16-46 доб.771
E-mail: MihalevichYUN@abrisplus.ru

Консультант раздела:

Служба качества

Тел.: (812) 740-16-80
E-mail: ZverevaAV@abrisplus.ru
Предыдущий товар

ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-МПО Определение миелопероксидазы в лейкоцитах

Следующий товар

ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-ПАС Определение гликогена в лейкоцитах

ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-НЭ Определение неспецифической эстеразы в лейкоцитах

Позвонить Позвонить
Заказать

Производитель «НПФ АБРИС+»

Получить консультацию

Состав набора:
реагент 1 - 1 фл, реагент 2 - 10 фл, реагент 3 - 1 фл, реагент 4 - 10 фл, реагент 5 - 1 фл.

  • Описание
  • Проведение анализа
  • Регистрационные удостоверения

Набор реагентов для определения активности неспецифической эстеразы в лейкоцитах, предназначен для определения активности неспецифической эстеразы в лейкоцитах в клинико-диагностических лабораториях, а также в научно-исследовательской практике.

Принцип метода: α-нафтилацетатэстераза ускоряет гидролизное расщепление α-нафтилацетата до уксусной кислоты и α-нафтола, чье соединение с диазониевой солью образует красно-коричневое окрашивание, нерастворимое в воде.

Исследуемый материал: кровь или костный мозг

Кат №452 - 10 определений

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:

Приготовление мазков крови и костного мозга:

2-3 мазка крови (или костного мозга) сделать на предметных стеклах с помощью более узкого предметного шлифованного стекла следующим образом. На сухое предметное стекло, ближе к короткой стороне наносят пипеткой небольшую каплю крови. Предметное стекло следует держать на столе или в левой руке за узкие края. Правой рукой приставить шлифованное стекло узким краем к стеклу с кровью слева от капли под углом 45° и продвинуть его вправо до соприкосновения с каплей крови. Выждать до тех пор, пока кровь расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением провести его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна так, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1 - 1,5 см до его края. Нельзя сильно нажимать на стекло, так как многие клетки крови могут оказаться поврежденными. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается “метелочкой”.

После приготовления мазки следует быстро высушить на воздухе до исчезновения влажного блеска. При медленном высыхании может изменяться морфология клеток крови.

Приготовление маточного раствора: содержимое флакона реагента 1 растворить в реагенте 5 и 2,5мл дистиллированной воды. Хранить в холодильнике до 3 месяцев.

Рабочий раствор: перед началом окраски в 25мл дистиллированной воды растворить 0,5мл маточного раствора из холодильника. Добавить 2,5мл реагента 3 и содержимое флакона реагента 2. Смешать.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА:

1.     Зафиксировать мазки в парах формалина 10-15 минут;
2.     Быстро ополоснуть;
3.     Хорошо высушить;
4.     Погрузить мазки в рабочий раствор, так чтобы мазок контактировал с рабочим раствором на 120 минут, периодически взбалтывая не менее четырех раз за время окрашивания;
5.     Смыть проточной водой 10 секунд;
6.     Докрасить ядра гематоксилином 30 минут при необходимости;
7.     Промыть стекла в проточной воде 2 минуты;
8.     Высушить.

Процедура окраски с фтористым натрием.

Разделить рабочий раствор на две равные части. В одну часть добавить содержимое флакона реагента 4 для подавления реакции. Исследования проводят параллельно.

Результаты окраски:

Альфа-нафтилацетат эстераза выявляется в виде красно- коричневых гранул в цитоплазме клеток.

Примечание: цитохимические исследования проводят в мазках крови, костного мозга, лейкоконцентрата, спинномозговой жидкости, аспиратах лимфоузлов, селезёнки, лейкозных инфильтратах разной локализации. Мазки крови и костного мозга лучше делать непосредственно из материала, полученного без добавления антикоагулянтов. При выраженной лейкопении цитохимические исследования целесообразно проводить в препаратах, полученных из лейкоконцентрата венозной крови. Используются только свежие нативные сухие препараты, которые должны сохнуть на воздухе не менее 30 минут. Препараты фиксируют сразу после высушивания на воздухе. Зафиксированные мазки могут храниться в темноте при комнатной температуре в течение трёх дней.

Оценка результатов цитохимических реакций.

При цитохимических реакциях необходимо определить характер цитохимических реакций – слабая, умеренная, интенсивная, с указанием процента положительно реагирующих клеток.

С этой целью применяют полуколичественный метод оценки результатов в условных единицах или вычислением среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Принцип его заключается в оценке интенсивности окраски и числа положительных гранул при анализе 100 клеток:

0- отсутствие окраски цитоплазмы расценивается как отрицательная реакция;
+ - слабодиффузное окрашивание или единичные гранулы в цитоплазме;
++ - диффузная окраска цитоплазмы, наличие умеренного числа гранул;
+++ - интенсивное окрашивание цитоплазмы, многочисленные гранулы, заполняющие всю клетку.


После оценки интенсивности окраски цитохимической реакции проводят расчет результатов в условных единицах или СЦК.

Вычисление среднего цитохимического коэффициента по формуле Astaldi и Verga: 3хС+2хВ+А

Оценка результатов в условных единицах по методике Karlow:
СЦК = (3хС+2хВ+А) / 100, где
А – количество клеток со слабоположительной реакцией;
В – количество клеток с умеренно положительной реакцией;
С – количество клеток с резко выраженной реакцией.

При этом показатель активности реакций в условных единицах может колебаться от 0 до 300, а СЦК – от 0 до 3%




22-ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-НЭ.jpg


ВОПРОСЫ-ОТВЕТЫ

Вопрос:
Можно ли разводить краситель по Романовскому 1:5 ?

Подробнее

СТАТЬИ

Цитохимические исследования эритроцитов

Авторы:
Зенина М.Н. Ассистент кафедры КЛД СЗГМУ им.И.И.Мечникова
Черныш Н.Ю. Доцент кафедры лабораторной медицины и генетики НМИЦ им.В.А.Алмазова

Читать далее

ОТЗЫВЫ

Отзыв о наборе Цито-ПАП Окраска по Папаниколау:

Цитологическая лаборатория б-цы Петра Великого Университета Мечникова, г.Санкт-Петербург

Читать далее


НАШИ ПАРТНЕРЫ:

Войти в систему