8 800 333 73 24БЕСПЛАТНО ПО РОССИИ

ДИАХИМ - Ликвор

Консультант раздела:

Специалист по гематологии, цитологии и цитохимии (продукция производства НПФ «АБРИС+») Михалевич Юлиана Николаевна

Тел.: (812) 740-16-46 доб.771
E-mail: MihalevichYUN@abrisplus.ru

Консультант раздела:

Служба качества

Тел.: (812) 740-16-80
E-mail: ZverevaAV@abrisplus.ru
Предыдущий товар

ДИАХИМ - КАТО Исследование фекалий по методу Като

Следующий товар

ДИАХИМ - Набор для исследования на гельминты (по Рабиновичу)

ДИАХИМ - Ликвор

Позвонить Позвонить
Заказать

Производитель «НПФ АБРИС+»

Получить консультацию

Набор реагентов для анализа спинномозговой жидкости (СМЖ)
Состав набора: реактив Самсона - 1 фл, карболовая кислота - 1 фл, аммоний сернокислый - 1 фл.

  • Описание
  • Проведение анализа
  • РУ

Набор реагентов для клинического анализа спинномозговой жидкости, предназначен для определения цитоза, качественного определения общего белка и качественного определения глобулинов в спинномозговой жидкости в клинико-диагностических лабораториях.

Принцип метода:

Клеточный состав (цитоз). Реактив Самсона предотвращает цитоз клеток в смесителе в течение нескольких часов. Уксусная кислота, которая содержится в реактиве, растворяет эритроциты, фуксин окрашивает ядра клеток в интенсивный красный цвет, что облегчает счет клеток и их дифференцирование.

Белок общий. Качественная реакция Панди. Белок с раствором фенола дает помутнение, интенсивность которого зависит от содержания белка.

Глобулины. Качественная реакция Нонне-Апельта. При взаимодействии глобулинов с насыщенным раствором сернокислого аммония появляется помутнение, интенсивность которого зависит от содержания глобулинов (осаждаются такие белковые фракции, которые остаются не осажденными в реакции Панди).

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:

Приготовление реактива Панди: карболовую кислоту (2,5 г) растворить в 25 мл воды дистиллированной при активном перемешивании и поместить в термостат при 37°С на сутки. В течение этого времени жидкость необходимо несколько раз перемешать. Далее реактив оставить на 1 сутки при температуре 18-25°С. Прозрачная надосадочная жидкость и является реактивом Панди. хранить при температуре 18-25°С в темном месте в течение срока годности набора. При снижении температуры реактив мутнеет, при подогревании становится прозрачным и пригодным к использованию.

Приготовление насыщенного раствора аммония сернокислого: навеску аммония сернокислого (85 г) перенести в коническую колбу вместимостью 200 мл, растворить в 100 мл дистиллированной воды при кипячении. Полученный раствор выдержать в течение 12 часов при комнатной температуре и отфильтровать. Приготовленный раствор должен иметь рН 7,0-7,1, поэтому его следует подщелочить раствором аммиака 10 %-го, осторожно добавляя его по каплям (~3 капли). Насыщенный раствор сернокислого аммония хранить при температуре 18-25°С в течение года.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА:

Определение цитоза:

1.     Спинномозговую жидкость тщательно размешать в течение 2 мин;
2.     Смешать в смесителе для лейкоцитов с реактивом Самсона:
2.1.     До первой метки набрать реактив;
2.2.     До второй метки набрать спинномозговую жидкость;
3.     Смеситель встряхнуть и оставить на 10-15 мин для прокрашивания клеточных элементов;

Если смесителя нет или жидкости очень мало, допускается смешивание спинномозговой жидкости с реактивом Самсона в соотношении: 10 капель СМЖ и 1 капля реактива.

1.     Окрашенную жидкость интенсивно встряхнуть;
2.     Вылить из смесителя первые 1-2 капли;
3.     Заполнить счётную камеру;
4.     Заполненную камеру оставить в горизонтальном положении на 1 мин для оседания клеточных элементов.

Наиболее удобна камера Фукса-Розенталя.

Подсчет клеток:

Не меняя горизонтального положения, камеру поместить на столик микроскопа. Подсчет клеток производить во всей сетке при малом увеличении микроскопа (окуляр 15х, объектив 8х). При очень большом количестве клеток допускается подсчет половины сетки с последующим умножением результатов на 2

Учет результатов:

Камера Фукса-Розенталя:

Количество клеток в 1 мкл рассчитать по формуле (1):

формула 1.jpgт.е. приблизительно формула 2.jpg      (1),

где А – количество клеток во всей камере;

       3,2 – объем камеры, мкл;

      11/10 – степень разведения спинномозговой жидкости реактивом Самсона.

Камера Горяева:

При использовании камеры Горяева для получения более точного результата необходимо считать не менее 3 камер, взяв затем среднее арифметическое значение.

Количество клеток в 1 мкл рассчитать по формуле (2):

формула 3.jpg     или      Х = А 1,2            (2),

где А – количество клеток во всей камере;

       0,9 – объем камеры, мкл;

       11/10 – степень разведения спинномозговой жидкости реактивом Самсона.

Определение содержания белка. Качественный анализ (реакция Панди):

1.     На предметное стекло налить 2 капли реактива Панди;
2.     Сбоку поместить 1-2 капли спинномозговой жидкости, так чтобы обе жидкости слились;
3.     Через 2 минуты визуально на темном фоне учесть результаты реакции.
В области соприкосновения реактива и спинномозговой жидкости возникает помутнение, выраженность которого зависит от содержания белка.

Степень помутнения обозначить крестами:

(+) - слабая опалесценция,
(++) - заметная опалесценция,
(+++) - умеренное помутнение,
(++++) - значительное помутнение.

Определение глобулинов (реакция Нонне–Апельта):

1.    В пробирку внести 0,5 мл насыщенного раствора сернокислого аммония;
2.    Добавить 0,5 мл спинномозговой жидкости;
3.    Перемешать;
4.    В контрольную пробирку (холостая проба) внести 1,0 мл воды;
5.    Через 2 минуты визуально учесть результаты реакции, сравнивая опытную и контрольную пробы на темном фоне.

Помутнение спинномозговой жидкости через 3 минуты и более не учитывается. Минимальная определяемая концентрация глобулинов – 0,05 г/л (0,3 г/л общего белка).

Степень помутнения обозначить крестами:

(+) - слабая опалесценция,
(++) - заметная опалесценция,
(+++) - умеренное помутнение,
(++++) - значительное помутнение.

Примечание: Реакция Панди осаждает такие белковые фракции, которые остаются неосажденными в реакции Нонне-Апельта, поэтому целесообразно ставить обе реакции одновременно.

60-1-DIAKhIM-LIKVOR.jpg

60-2-DIAKhIM-LIKVOR.jpg


ВОПРОСЫ-ОТВЕТЫ

Вопрос:
Почему при окрашивании по Папаниколау ядра окрашиваются очень бле...

Подробнее

СТАТЬИ

Цитохимические исследования эритроцитов

Авторы:
Зенина М.Н. Ассистент кафедры КЛД СЗГМУ им.И.И.Мечникова
Черныш Н.Ю. Доцент кафедры лабораторной медицины и генетики НМИЦ им.В.А.Алмазова

Читать далее

ОТЗЫВЫ

Отзыв о наборе Цито-ПАП Окраска по Папаниколау:

Цитологическая лаборатория б-цы Петра Великого Университета Мечникова, г.Санкт-Петербург

Читать далее


НАШИ ПАРТНЕРЫ:

Войти в систему