ДИАХИМ-ДИФФ-КВИК Набор для быстрого дифференцированного окрашивания биопрепаратов (кровь, эякулят, выпотные жидкости и др.)

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:

1. Приготовление забуференной воды:

Содержимое флакона с буферной смесью развести в 3-х литрах дистиллированной воды. рН забуференной воды должен находиться в диапазоне 6,8 - 7,2.

2. Приготовление мазков крови и эякулята:

Предметное стекло перед исследованием тщательно вымыть и обезжирить смесью для обезжиривания предметных стекол производства «АБРИС+».

2-3 мазка крови или эякулята сделать на предметных стеклах с помощью более узкого предметного шлифованного стекла следующим образом.

Взяв предметное стекло за длинные края, прикоснуться его поверхностью (отступив на 0,5-1 см от узкого края) к капле препарата. Предметное стекло следует держать на столе или в левой руке за узкие края. Правой рукой приставить шлифованное стекло узким краем к стеклу с кровью слева от капли под углом 45° и продвинуть его вправо до соприкосновения с каплей препарата. Выждать до тех пор, пока препарат расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением провести его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна так, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1 - 1,5 см до его края. Нельзя сильно нажимать на стекло, так как многие клетки крови могут оказаться поврежденными. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается “метелочкой”. После приготовления мазки следует быстро высушить на воздухе до исчезновения влажного блеска. При медленном высыхании может изменяться морфология клеток. Затем надо уложить предметные стекла мазками кверху на стеклянный мостик для окраски.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1)    Непосредственно перед окрашиванием высушенные на воздухе мазки фиксировать в Растворе №1 окунанием в раствор на 15 секунд;
2)    Удалить остаток Раствора №1, поставив стекло вертикально на фильтровальную бумагу;
3)    Окрасить препараты Раствором №2 («розовым») окунанием в раствор на 10 секунд;
4)    Удалить избыток раствора со стекла, поставив стекло вертикально на фильтровальную бумагу;
5)    Окрасить препараты Раствором №3 («синим») окунанием в раствор на 10 секунд;
6)    Удалить избыток раствора со стекла, поставив стекло вертикально на фильтровальную бумагу;
7)    Промыть стекла с препаратом в забуференной воде;
8)    Высушить;
9)    Микроскопировать с иммерсионной системой.

Примечание: интенсивность окраски регулировать числом погружений в Раствор №2 и Раствор №3

Результаты окраски:

Ядра клеток окрашиваются в различные оттенки синего цвета (от синего до сине-сиреневого цвета), цитоплазма в розовый цвет.