АЛТ UV-КИНЕТИКА АБРИС+

ПОДГОТОВКА КОМПОНЕНТОВ К АНАЛИЗУ

Монореагентный способ постановки:
Приготовить Рабочий реагент, смешав Реагент 1 и Реагент 2 в соотношении 4 к 1. Рабочий реагент стабилен при температуре хранения от 2 до 8°С не более 21 дня в плотно закрытом флаконе в защищенном от света месте.

Биреагентный способ постановки:
Реагенты 1 и 2 готовы к использованию.
Следует тщательно закрывать флаконы с Реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования, в том числе при хранении на борту автоматических биохимических анализаторов (в нерабочее время).

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
λ = 340 нм.
d = 1 см.

Температура проведения реакции: +37°С.
Измерение против воздуха или воды.
Исследование проводить непосредственно в термостатируемой +37°С фотометрической кювете анализатора. Непосредственно перед использованием нагреть кювету и реагенты до температуры +37°С.

Стандартная процедура анализа

1. Монореагентный способ постановки - запуск реакции образцом.
Таблица 1.

Внести в кювету:	Опытная проба	Калибровочная проба (в случае использования мультикалибратора)
Рабочий реагент, мкл	1000	1000
Исследуемый образец, мкл	100	---
Мультикалибратор (не входит в состав набора), мкл	---	100
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 1 минуты. Измерить оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 мин при λ = 340 нм, d = 1 см. Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 мин (∆Е/мин).

2. Биреагентный способ постановки - запуск реакции субстратом
Таблица 2.

Внести в кювету:	Опытная проба	Калибровочная проба (в случае использования мультикалибратора)
Реагент 1, мкл	800	800
Исследуемый образец, мкл	100	---
Мультикалибратор (не входит в состав набора), мкл	---	100
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 1 минуты. Добавить:
Реагент 2, мкл	200	200
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 1 минуты. Измерить оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 мин, λ = 340 нм, d = 1 см Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 мин (∆Е/мин).

Примечания.
1. Расход реагентов набора на 1 анализ и объем анализируемых образцов зависит от типа используемого прибора и объема кюветы. Объемы реагентов и образца могут быть пропорционально изменены при соблюдении соотношения образец/реагент как 1:10 при монореагентном способе постановки и Реагент 1/образец/Реагент 2 как 8:1:2 при биреагентном способе постановки.
2. Если значение активности аланинаминотрансферазы в анализируемой пробе превышает 600 МЕ/л, анализируемую пробу следует развести физиологическим раствором (0.9% NaCl) и повторить анализ. Полученный результат умножить на фактор разведения.

РАСЧЁТ

По фактору:
Расчёт активности аланинаминотрансферазы (А _пробы, МЕ/л)
для исследуемой пробы провести по формуле:

А _пробы = ΔЕ _{пробы/мин} х 1746

где:   ΔЕ _{пробы/мин} – изменение оптической плотности исследуемой пробы в мин, ед.опт.пл.;

1746 – фактор для выражения активности в МЕ/л.

По мультикалибратору (не входит в состав набора):

Расчёт активности аланинаминотрансферазы (А _пробы, МЕ/л) для исследуемой пробы провести по формуле:

А _пробы = (ΔЕ _{пробы/мин} /ΔЕ _МК/мин ) х А _МК

где:   ΔЕ _{пробы/мин} – изменение оптической плотности исследуемой пробы в мин., ед.опт.пл.;
ΔЕ _МК/мин – изменение оптической плотности мультикалибратора в мин., ед.опт.пл.;
А _МК – аттестованное значение активности АЛТ в мультикалибраторе, МЕ/л.

Для контроля правильности и воспроизводимости результата лабораторного анализа рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованным по данному методу показателем.

РЕФЕРЕНТНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ

Мужчины старше 18    до 40 МЕ/л
Женщины старше 18   до 31 МЕ/л
Дети от 12 до 17             до 27МЕ/л
Дети от 1 до 12               до 34 МЕ/л
Дети до года     до 56 МЕ/л
Новорожденные – до 40 МЕ/л

Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить референтный интервал значений нормальных величин для обследуемого контингента людей с учётом возраста, пола, диеты и географического положения исследуемой популяции.